Ce programme d’atelier se compose de cinq ateliers vise à fournir aux étudiants les bases nécessaires pour la maitrise du processus de purification des enzymes et des différents paramètres utilisés pour évaluer l’efficacité de la purification.
La purification des protéines est une série de processus visant à isoler une protéine d’un mélange complexe. La purification des enzymes est nécessaire pour leur caractérisation et pour leur application dans des domaines tels que la recherche et la médecine.
Dans ce contexte, l'atelier est programmé comme suit :
1- Ouverture et explication. Rappels sur la sécurité au laboratoire.
2- Préparation des solutions et milieux de culture.
3- Production de l’enzyme α-amylase par fermentation.
4- Précipitation fractionnelle au sulfate d’ammonium de l’enzyme α-amylase.
5- Elimination du sulfate d’ammonium par dialyse.
6- Chromatographie d'exclusion.
7- Chromatographie d’affinité.
8- Evaluation de la purification (Tableau de purification, SDS-PAGE, zymogramme).
9- Caractérisation de l’enzyme alpha-amylase et détermination de l’effet des paramètres physico-chimiques sur l’activité et la stabilité de l’enzyme.
10- Détermination des paramètres cinétiques de l’enzyme.
11- Evaluation, débat et clôture.
- Enseignant: badra KHODJA